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1.国际临床化学与医学实验室联盟(IFCC)
测定HbA1c国际公认的参考方法为IFCC推荐的高效液相色谱串联电喷雾电离一级质谱或高效液相色谱串联毛细管电泳,两种方法结果一致。
测定方法主要分为三步:
第一,制备溶血液;
第二,采用蛋白内切酶Glu-C将溶血液酶解消化,得到糖基化和非糖基化的β链N末端六肽(HbA1c六肽、HbA0六肽);
第三,采用高效液相色谱串联电喷雾电离一级质谱或高效液相色谱串联毛细管电泳对HbA1c六肽和HbA0六肽进行定量分析。以标准物质IRMM/IFCC-466 HbA1c和IRMM/IFCC-467 HbA0的混合物作为校准品,同步进行酶解、分析,得到标准曲线,根据HbA1c、六肽、HbA0六肽的峰面积比计算得出HbA1c的量。
2.HbA1c测定指定比对方法(DesignatedComparison Method,DCM)
美国国家糖化血红蛋白标准化计划(NGSP)使用离子交换高效液相色谱法为参考方法,目前为HbA1c测定的指定比对方法,方法原理主要基于HbA1c与其他组分所带的电荷不同,分别洗脱检出,由于受技术条件的限制,不能特异测定HbA1c,有其他组分同时检出,因此,测定结果高于IFCC结果。 IFCC参考实验室及NGSP参考实验室经过几年的比对,得出结论:NGSP测定结果与IFCC测定结果之间存在非常确定的相关性,可用回归方程表示为:NGSP-HbA1c=0.0915×(IFCC-HbA1c)+2.15%(r2=0.998),因此,现行的NGSP结果可以溯源到IFCC参考系统,即可以溯源到溯源链的最高等级国际单位(SI单位)制。
注:文章节选自‘检验医学·中华检验医学网